Biofilter Medievalg til Largemouth Bass- Biofilmegenskaber og vækstydelse
Largemouth bass (Micropterus salmoides), også kendt som californisk bas, tilhører Actinopterygii, Perciformes, Centrarchidae, Micropterus. Det er hjemmehørende i Californien, USA, og har fordele som hurtig vækst, lækker smag, rig ernæring og høj økonomisk værdi. Det er blevet en af de vigtige ferskvands-akvakulturarter i Kina. I de senere år er der gradvist opstået industrialiseret recirkulerende akvakultur på baggrund af fiskeritransformation og -opgradering og den kraftige udvikling af digitalt og intelligent fiskeri. Akvakulturtilstanden for largemouth bass skifter også fra traditionel damkultur til grøn og effektiv recirkulerende akvakulturtilstand. Recirkulerende akvakultur har fordele såsom vand- og jordbesparelse, høj belægningstæthed og bekvem håndtering. Gennem fysiske, biologiske, kemiske metoder og udstyr fjernes eller omdannes faste suspenderede stoffer og skadelige stoffer i vandmassen til uskadelige stoffer, således at vandkvaliteten opfylder de dyrkede arters normale vækstbehov, og derved realiseres genanvendelse af vand under akvakulturforhold med høj-densitet. Det har opnået gode økonomiske fordele i flere dyrkede arter.
I øjeblikket fokuserer forskning i recirkulerende akvakultur af largemouth bass hovedsageligt på reproduktion, foderernæring, udvælgelse af stammer, præcis fodring, ændringer i vandmiljøet og ernæringsmæssig kvalitet. Forskning i indendørs industrialiseret recirkulerende akvakultur af largemouth bass fokuserer hovedsageligt på dyrkning af store-ungfisk, og fuld-opdræt af voksne fisk er ikke blevet fremmet bredt. Den største udfordring, som recirkulerende akvakultur står over for, er at opretholde et godt vandmiljø under forhold med høj-densitet for at sikre den normale vækst af de dyrkede arter. Vandbehandling er kernen i recirkulerende akvakultur, og effektive vandbehandlingsbiofiltermedier er grundlaget for vandbehandlingssystemet. Selvom der er mange rapporter om vandrensning ved hjælp af biofiltermedier, mangler der rapporter specifikt om largemouth bass industrialiseret recirkulerende akvakultur, især vedrørende screening af effektive vandbehandlingsbiofiltermedier, den mikrobielle samfundsstruktur af biofilm på forskellige biofiltermedier, behandlingseffekter og indvirkning på væksten af de dyrkede arter. Tre typer biofiltermedier blev udvalgt, blandt hvilke biofiltermedierne med kvadratisk svamp og fluidiseret lejekugle er lave-omkostninger og enkle at betjene og er blevet brugt i vid udstrækning i akvakulturens halevandsbehandling; Mutag Biochip 30 (forkortet som Biochip) er en ny type biofiltermedie, der er dukket op i de senere år, med fordele ved slagfasthed og lang levetid, men dens praktiske anvendelseseffekter er ikke blevet rapporteret. Til dette formål blev 16S rDNA high-throughput sekventeringsteknologi brugt til at analysere biofilmdannelsessituationen for de tre vandbehandlingsbiofiltermedier, samtidig med at vækstsituationen for largemouth bass blev analyseret, for at frasortere praktiske vandbehandlingsbiofiltermedier og levere effektive vandbehandlingsmedier til largemouth bass industrialiseret recirkulerende akvakultur.
1. Materialer og metoder
1.1 Testmaterialer
Biofiltermedierne udvalgt til denne test varfirkantet svamp, Biochip, ogkugle med fluidiseret leje, som vist iFigur 1. Det firkantede svampemateriale er polyurethan, formet som en terning med en sidelængde på 2,0 cm, specifikt overfladeareal (3,2~3,5)×10⁴ m²/m³. Biochip-materialet er polyethylen, formet som en cirkel med en diameter på 3,0 cm, tykkelse ca. 0,11 cm, specifikt overfladeareal 5,5×10³ m²/m³. Det fluidiserede lejekuglemateriale er polyethylen, effektivt specifikt overfladeareal 500~800 m²/m³.
1.2 Eksperimentel gruppering
Den firkantede svampebiofiltermediebehandlingsgruppe blev sat som gruppe T1, den tilsvarende mediebiofilm blev mærket B1, og det tilsvarende akvakulturvand blev mærket W1; Biochip-biofiltermediebehandlingsgruppen blev sat som gruppe T2, den tilsvarende mediebiofilm blev mærket B2, og det tilsvarende akvakulturvand blev mærket W2; fluid bed ball-biofiltermediebehandlingsgruppen blev sat som gruppe T3, den tilsvarende mediebiofilm blev mærket B3, og det tilsvarende akvakulturvand blev mærket W3.
1.3 Akvakultursystem
Eksperimentet blev udført i et recirkulerende akvakultursystem på Balidian Comprehensive Experimental Base ved Zhejiang Institute of Freshwater Fisheries.Der var i alt 9 kulturtanke, volumen 500 L, effektiv vandvolumen 350 L. Biofiltertanken var lavet af et plastikakvarium, der målte 80 cm langt, 50 cm bredt og 50 cm højt, volumen 200 L, effektiv vandvolumen 120 L. Dyrkningstanken og biofiltertanken blev forbundet med en vandpumpe for at danne en intern cirkulation, flowhastighed 3~4 L/min, med beluftning til oxygenering, vandopløst oxygen holdt over 5 mg/L. Biofiltermedierne blev tilfældigt grupperet, hver type biofiltermedie havde 3 replikater, hver biofiltertank blev fyldt med 2,0 kg biofiltermedier, mens en kulstofkilde med langsom-frigivelse blev suspenderet. Under biofilmdyrkningsperioden blev 10 % af vandet skiftet dagligt.Indledende vandkvalitetsindikatorer: Total Nitrogen (TN) 9,41 mg/L, Total Fosfor (TP) 1,02 mg/L, Ammoniak Nitrogen (TAN) 1,26 mg/L, Nitrit Nitrogen (NO₂⁻-N) 0,04 mg/L, Permanganat-indeks (L3) 3..
1.4 Test Fiske- og Kulturforvaltning
Largemouth bass blev brugt som den dyrkede art. Før starten af testen blev de akklimatiseret i det recirkulerende vand i 7 dage.Testen blev udført fra 11. august 2022 til 22. september 2022 og varede i 42 dage. Largemouth bass uden overfladeskader, sunde og livlige, blev udvalgt til gruppering, 60 fisk blev udsat i hver kulturtank, fodret to gange dagligt, fodringstiderne var 07:00 om morgenen og 16:00 om eftermiddagen, den daglige fodermængde udgjorde omkring 1,0%~1,5% af den samlede fisks kropsmasse. Testfiskens indledende kropsmasse var (20,46 ± 0,46) g.
1.5 Prøveindsamling
Vandprøver fra biofiltertanken blev indsamlet hver 2. dag, der registrerede indikatorer som vandtemperatur, opløst ilt, pH-værdi og måling af ammoniak-nitrogen og nitrit-nitrogen. Fodermængde, fiskens kropsmasse ved starten og slutningen af forsøget og overlevelsesraten blev registreret. Efter eksperimentet blev 1 L vand fra hver kulturtank opsamlet ved hjælp af sterile vandopsamlingsposer, filtreret gennem en 0,22 µm filtermembran og opbevaret i en -80 graders fryser til senere brug. Biofiltermedieprøver på 0,5 g blev taget aseptisk fra hver biofiltertank, opbevaret i steriliseret destilleret vand, rystet kraftigt for at fjerne mikroorganismer fra biofilmoverfladen, derefter filtreret gennem en 0,22 µm filtermembran og opbevaret i en -80 graders fryser til senere brug.
1.6 Målemetoder
1.6.1 Måling af vandkvalitet
Vandtemperatur, opløst ilt og pH-værdi blev detekteret ved hjælp af enHACH Hq40d bærbar vandkvalitetsanalysator. Ammoniak nitrogenkoncentration blev målt ved hjælp af Nessler's reagens spektrofotometriske metode. Nitrit-nitrogenkoncentration blev detekteret ved anvendelse af den spektrofotometriske saltsyre-naphthylethylendiamin-metode.
1.6.2 Akvakultur præstationsmåling
Beregningsformlerne for fiskens vægtøgningshastighed, foderomsætningsforhold og overlevelsesrate for fisk er som følger.
l Vægtstigningshastighed= (Endelig fisks kropsmasse - Initial fish body mass) / Initial body mass × 100 %;
l Feedkonverteringsforhold= Foderforbrug / vægtøgning;
l Overlevelsesrate= (Antal fisk i slutningen af eksperimentet / Startantal fisk ved starten af eksperimentet) × 100 %.
1.6.3 Mikrobiel høj-gennemstrømningssekvens
Bakterie-DNA blev ekstraheret fra vand og biofilm ved hjælp af et Bacterial DNA Extraction Kit (OMEGA Biotech, USA). Specifikke primere 338F (5'-ACTCCTACGGGAGGCAGCAG-3') og 806R (5'-GGACTACHVGGGTWTCTAAT-3') blev brugt til at amplificere V3- og V4-regionerne af det bakterielle 16S rDNA. PCR brugte TransGen AP221-02-reaktionssystemet: 4 µL 5×FastPfu-buffer, 2 µL 2,5 mmol/L dNTP'er, 0,4 µL FastPfu-polymerase, 0,8 µL hver af 5 µmol/L af fremadgående og reverse B.SA-primere, 1 µl af DNA-primere, 0 µl 0,0 skabelon, suppleret med ddH2O til 20 µL. PCR-reaktionsbetingelser: 95 grader i 3 minutter; 95 grader i 30 s, 53 grader i 45 s, 72 grader i 1 min, 28 cyklusser; 72 grader forlængelse i 10 min. PCR-amplifikation blev udført på et PCR-reaktionsinstrument 9700 (Applied Biosystems® GeneAmp®, USA). PCR-produkter blev oprenset under anvendelse af Beads og derefter underkastet sekventering. Sekventering blev bestilt til Shanghai Majorbio BioPharm Technology Co., Ltd.
1.6.4 Mikrobiel mangfoldighedsanalyse
De rå data opnået fra sekventering blev først splejset, efterfulgt af kvalitetskontrolfiltrering af læsekvaliteten og splejsningseffekten og sekvensretningskorrektion, hvilket resulterede i optimerede data. Efter normalisering af de endeligt opnåede rene data blev OTU (Operational Taxonomic Units) klyngeanalyse og taksonomisk analyse udført ved 97% lighed. Histogrammer af prøverne blev tegnet ved hjælp af Excel, og varmekort blev tegnet ved hjælp af Majorbio Cloud Platform.
1.7 Dataanalyse
SPSS 16.0 statistisk software blev brugt til signifikansanalyse af forskelle, og Duncans metode til variansanalyse (ANOVA) blev brugt til flere sammenligninger.
2. Resultater og analyse
2.1 Biofilmdannelsestid for forskellige biofiltermedier
Som vist iFigur 2,under naturlige biofilmdannelsesforhold viste ammoniaknitrogenindholdet i vandet i biofiltertanken en tendens til hurtig stigning efterfulgt af gradvist fald.Indholdet af ammoniak nitrogeni vandet i biofiltertanken svarende til den firkantede svamp nåede sit højdepunkt efter 17 dage, ved 8,13 mg/L, og faldt derefter gradvist,når det laveste ved 41 dage, bagefter forbliver omkring 0,20 mg/L, hvilket indikerer detbiofilmdannelsestiden for den firkantede svamp var ca. 17 dage. Ændringerne i indholdet af ammoniak-nitrogen i vandet i biofiltertankene svarende til Biochip og kuglen med fluidiseret leje var stort set de samme og viste svingende ændringer. Ammoniak-nitrogentoppen viste sig efter 21 dage ved henholdsvis 7,88 mg/L og 7,57 mg/L, hvilket indikerer, atbiofilmdannelsestiden for Biochip og fluid bed ball biofiltermediet var ca. 21 dage. Indholdet af ammoniak nitrogeni biofiltertankene svarende tildisse to medier faldt til det laveste med henholdsvis 43 dage og 45 dage.
2.2 Ændringer i vandets pH-værdi i forskellige kulturtanke
FraFigur 3, kan det ses, at den oprindelige pH-værdi af kulturvandet var 7,3. Efterhånden som dyrkningstiden forlængede, viste pH-værdien af vandet i hver kulturtank en nedadgående tendens. Efter 12 dage var pH-værdien af alle dyrkningstanke mindre end 6,0, hvilket er ugunstigt for væksten af de dyrkede arter.Derfor bør man efter 12 dages biofilmdannelse være opmærksom på at justere pH-værdien af dyrkningstankens vand.
2.3 Analyse af mikrobiel fællesskabssammensætning på biofilm af forskellige biofiltermedier og i vand
2.3.1 Mikrobiel fællesskabssammensætning på filumniveau
Som vist iFigur 4,på phylum-niveau var de dominerende bakterier på biofilmene i de tre biofiltermedier de samme, alle er Proteobacteria, Actinobacteriota, Bacteroidota og Chloroflexi. Deres kombinerede relative mængder var henholdsvis 68,96 %, 64,74 % og 65,45 %. De dominerende bakterier i det tilsvarende kulturvand var forskellige. De dominerende bakterier i W1 var Actinobacteriota, med en relativ overflod på 64,66%. De dominerende bakterier i W2 og W3 var proteobakterier med relative mængder på henholdsvis 34,93 % og 50,10 %.
Fig. 4 Fællesskabssammensætning af bakterier i forskellige biofilm og vand på filumniveau
2.3.2 Mikrobiel samfundssammensætning på familieniveau
Som vist iFigur 5På biofilmene fra de tre medier var omkring 48 % af bakterierne bakteriesamfund med relative mængder alle mindre end 3 %. De dominerende bakterier i B1 og B2 var de samme, begge er Xanthomonadaceae, med relative mængder på henholdsvis 11,64% og 9,16%; de dominerende bakterier i B3 var JG30-KF-CM45, med en relativ overflod på 10,54 %. De dominerende bakterier i kulturvandet var forskellige fra dem på biofiltermediet. Microbacteriaceae var de absolut dominerende bakterier i W1, med en relativ overflod på 62,10 %; de dominerende bakterier i W2, udover Microbacteriaceae (13,82%), omfattede også en vis andel af Rhizobiales (8,57%); de dominerende bakterier i W3 var Rhizobiales, med en relativ forekomst på 38,94%, efterfulgt af Flavobacteriaceae, med en relativ forekomst på 15,89%.
De 50 bedste arter på slægtsniveau blev talt. Efter behandling af de numeriske værdier blev abundanceændringerne for forskellige arter i prøverne vist gennem farvegradienten af farveblokkene. Resultaterne er vist iFigur 6. Leifsonia var den dominerende bakterie i W1, med en relativ forekomst på 56,16%; de dominerende bakterier i W2 var Leifsonia (10,30%) og Rhizobiales_Incertae_Sedis (8,47%); de dominerende bakterier i W3 var Rhizobiales_Incertae_Sedis, med en relativ overflod på 38,92%. Blandt de identificerbare bakterier på biofilmene var Thermomonas den dominerende slægt i B1 med en relativ overflod på 4,71 %; de dominerende slægter i B2 og B3 var Nitrospira, med relative mængder på henholdsvis 4,41 % og 2,70 %.
Fig. 5 Fællesskabssammensætning af bakterier i forskellig biofilmog vand på familieniveau
Fig. 6 Heatmap over bakteriesamfundets sammensætning i forskellige biofilm og vand på slægtsniveau
2.4 -Diversitetsanalyse af mikrobielle samfund på biofilm af forskellige biofiltermedier og i vand
Som vist iTabel 1, var Shannon-indekset for de mikrobielle samfund på forskellige mediers biofilm større end det tilsvarende kulturvands, mens Simpson-indekset var det modsatte. Ved at analysere det tilsvarende kulturvand var bakteriesamfundets Shannon-indeks for W2 det højeste, signifikant højere end det for W1 og W3, mens Simpson-indekset var signifikant lavere end det for W1 og W3, hvilket indikerer, at dets -diversitet var den højeste. Forskellig fra kulturvandets -diversitet, selvom det bakterielle mikrobielle samfund Shannon-indekset i B2-mediet var det største og Simpson-indekset var det mindste, var der ingen signifikant forskel mellem de tre biofiltermedier. Sekvenseringsdækningen af alle prøver var over 0,990, hvilket indikerer, at sekventeringsdybden kunne afspejle prøvernes sande niveau.
2.5 Effekter af forskellige biofiltermedier på væksten af largemouth bas
Tabel 2viser vækstsituationen for largemouth bass i de forskellige biofilter-mediegrupper. Efter 44 dages dyrkning var den endelige kropsmasse og vægtøgningshastighed for largemouth bass i gruppen med kvadratisk svampekultur signifikant højere end dem i fluid bed ball- og Biochip-grupperne, og foderomsætningsforholdet var signifikant lavere end i de andre grupper. Overlevelsesraten for largemouth bass i hver gruppe var over 97%, uden signifikant forskel mellem grupperne.
3. Konklusion og diskussion
3.1 Biofilmdannelsestid for forskellige biofiltermedier
Biofilm hæfter til overfladen af biofiltermedier. Biofiltermediets materiale, struktur og specifikke overfladeareal er de vigtigste faktorer, der påvirker biofilmdannelsen. Der er to almindelige metoder til biofilmdyrkning: den naturlige biofilmdannelsesmetode og den inokulerede biofilmdannelsesmetode. Forskellige metoder til biofilmdannelse påvirker biofilmens modningstid. Hu Xiaobing et al. brugt fire forskellige metoder til biofilmdannelse, og resultaterne viste, at ved brug af metoder som tilsætning af chitosan, jernioner og podning med udledt slam til biofilmdannelse, var modningstiden for biofilmen kortere end den naturlige biofilmdannelsesmetode. Selvom tilsætning af gavnlige mikroorganismer eller aktive stoffer kan forkorte biofilmdannelsestiden, er der problemer såsom vanskeligheder med at opnå podestoffet, kompleks proceskonstruktion og høje omkostninger. Guan Min et al., under forhold med lavt indhold af organisk stof, brugte direkte råvand til biofilmdannelse, og biofiltertanken startede med succes gennem naturlig biofilmdannelse efter omkring 38 dage. Dette forskningsresultat svarer til resultaterne af denne undersøgelse. Resultaterne af denne undersøgelse viser, at under de samme biofilmdannelsesbetingelser var biofilmdannelsestiden for den firkantede svamp kortere end for de to andre biofiltermedier. Dette kan være relateret til den firkantede svamps store specifikke overfladeareal, stærke hydrofilicitet og lette biofilmbinding. Det specifikke overfladeareal af den firkantede svamp er så højt som 32.000~35.000 m²/m³, meget større end de to andre medier. Ydermere er materialet i den firkantede svamp polyurethan, som udvider sig, når det udsættes for vand, har høj hydrofilicitet, og er befordrende for vedhæftning og vækst af mikroorganismer i vandet. Forskningsresultaterne af Li Yong et al. viste også, at opstartsydelsen og ammoniaknitrogenfjernelsen af polyurethansvamp var bedre end polypropylen, hvilket er i overensstemmelse med resultaterne af denne undersøgelse. Derudover var det specifikke overfladeareal af Biochip-biofiltermediet i denne undersøgelse så højt som 5.500 m²/m³, meget større end det for fluidiseret lejekugle-biofiltermediet, men biofilmdannelsestiden var stort set den samme som for kuglemediet med fluidiseret leje. Dette kan være relateret til porestørrelsen. Nogle undersøgelser har påpeget, at den indre rumlige skala af biofiltermedier påvirker væksten af biofilm. Selvom nogle biofiltermedier har et stort specifikt overfladeareal, er deres porer fine, og porestørrelsen er meget mindre end tykkelsen af den modne biofilm, hvilket let kan føre til poreblokering, hvilket gør det svært for biofilmen i porerne at nå maksimal ophobning. Biochippens porer er små, hvilket resulterer i langsommere biofilmvækst og længere biofilmdannelsestid.
3.2 Mikrobiel fællesskabssammensætning af biofiltermedier og kulturvand
I denne undersøgelse var de dominerende bakterier på biofiltermediet og i det tilsvarende kulturvand forskellige. Shannon-indekset for biofilmene på biofiltermediet var større end for det tilsvarende dyrkningsvand, hvilket indikerer, at biofiltermedierne har den virkning, at de beriger mikroorganismer. Dette er i overensstemmelse med forskningsresultaterne af Hu Gaoyu et al. Der er mange faktorer, der påvirker den mikrobielle samfundsstruktur, såsom bærertype, filterdybde, saltholdighed, koncentration af organisk stof osv. De samme biofiltermedier vil under forskellige dyrkningsbetingelser have forskellige mikrobielle samfund på biofilmen. Forfatteren studerede engang biofilmdannelsessituationen for biofiltermedier med fluidiseret lejekugle i et recirkulerende akvakultursystem for kæmpe ferskvandsrejer (Macrobrachium rosenbergii). Resultaterne viste, at den dominerende phylum på dens biofilm var Firmicutes, hvorimod den dominerende phylum på fluid bed ball-biofilmen i denne undersøgelse var Proteobacteria. Hovedårsagen til denne forskel kan være de forskellige akvakulturmiljøer. De tre biofiltermedier, der blev brugt i denne undersøgelse, havde de samme startbetingelser for dyrkning af biofilm. Det er muligt, at på grund af mediets forskellige fysiske egenskaber var den dannede biofilmtykkelse og det indre miljø også forskellige, hvilket resulterede i forskelle i de mikrobielle samfund. Derfor er forskellen i bærere hovedårsagen til forskellene i mikrobielle samfund. Desuden påvirker vandmiljøet og det mikrobielle samfund hinanden under akvakulturprocessen. Årsagerne til forskellene i mikrobielle samfund kan være relateret til miljøfaktorer. For eksempel viste Yuan Cuilins forskning, at det samlede antal heterotrofe bakterier i kroppen; Fan Tingyu et al. mente, at pH-værdien i væsentlig grad kan påvirke det samlede kvælstofindhold i vand, og spiller en nøglerolle i udbredelsen af akvatiske bakteriesamfund i indre flodsektioner. Ammoniak-kvælstof, totalfosfor og klorofyl a påvirker også sammensætningen af bakteriesamfund i vandmassen i varierende grad. De miljømæssige faktorer, der forårsager forskellene i mikrobielle samfundssammensætning i denne undersøgelse, skal stadig bekræftes yderligere.
3.3 Effekter af forskellige biofiltermedier på væksten af largemouth bas
Ud fra vækstresultaterne voksede largemouth bassen i den firkantede svampegruppe hurtigst, med en vægtstigningshastighed, der var betydeligt højere end for de to andre medier, og den laveste foderomsætningsgrad. Dette er i overensstemmelse med tidligere forskningsresultater. I denne undersøgelse blev biofilmdannelse og akvakultur udført samtidigt. At dømme ud fra biofilmdannelsestiden modnede den firkantede svampebiofilm tidligere, og efter biofilmens modning var koncentrationerne af ammoniak-kvælstof og nitrit-kvælstof i vandet altid lavere end i de to andre medier. Derudover har den firkantede svamp en vis filtreringsevne, indholdet af faste suspenderede stoffer i kulturvandet var lavere, og vandet var relativt klart. Den bedre vækst af largemouth bass i den firkantede svampegruppe kan være relateret til den gode vandkvalitet. Imidlertid skal rensningseffekterne af de kvadratiske svampemedier på totalt nitrogen, totalt fosfor og permanganatindeks i vandet undersøges nærmere. Det er værd at bemærke, at pH-værdien under forsøget viste en overordnet nedadgående tendens. Efter 12 dages dyrkning var pH-værdien af alle dyrkningstanke mindre end 6,0, hvilket er i overensstemmelse med forskningsresultaterne fra Zhang Long et al. Faldet i pH-værdien skyldes, at der produceres et stort antal brintioner under processen med at dyrke biofilmen, hvilket fører til et fald i vandets pH-værdi. Derfor er det under biofilmdannelsesprocessen nødvendigt straks at justere pH-værdien af kulturtankvandet for at sikre, at det er inden for det normale vækstområde for den dyrkede art. I betragtning af økonomiske omkostninger er markedsprisen på firkantet svamp 70 ~ 100 RMB/kg, og dens omkostninger er mellem de to andre biofiltermedier. Kombineret med vækstresultaterne er den firkantede svamp på kort sigt et relativt praktisk vandbehandlingsbiofiltermedie til recirkulerende akvakultur. Den firkantede svamp har dog dårlig sejhed og kort levetid. Dets langsigtede-brugseffekter og akvakultureffekter skal bekræftes yderligere.
Sammenfattende,under naturlige biofilmdannelsesforhold har det firkantede svampebiofiltermedie den korteste biofilmdannelsestid, en moderat pris, og den endelige kropsmasse og vægtforøgelseshastigheden for largemouth bass i firkantsvampegruppen var signifikant højere end for de to andre biofiltermedier. På kort sigt er det et relativt praktisk vandbehandlingsbiofiltermedie til recirkulerende akvakultur.